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操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些
影响液相色谱保留时间的因素:
1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子,分离度和保留时间往往都会有点差别,所以在操作的时候:a、可以适当调整流动相的比列,如甲醇—水(90:10),如分离效果与保留时间延长,可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成,甲醇就可以换成乙腈,看具体的实际操作而定。
2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别,主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同,但保留时间一般不会相差太大,可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时,一般就调整到室温或者30度。
3、流速。流速的大小,液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、进样量。进样量大,保留时间往往会延长。
5、输液系统的压力,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,保留时间将会缩短。
具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察,经过调整后才可以的到较好的色谱条件。
高一的层析知识
层析,简单理解,就是让其中的成分分层显示,从而进行分析。
白色粉笔的作用是,它中含有孔隙,类似于毛细现象,使得溶剂被逐步吸着向上运动,从而导致其中的溶质也跟着向上运动,
是不是有色素成分的物质都可以被层析?--不是,层析是一种分离操作,所以适用于混合物的分析,即多种颜色的物质在运动时的速度是不一样的,所以在白色粉笔上就能出现各个不同的颜色段,就可以分析它的成分了,若这种有色物质只有1种,那么层析对它就没有任何意义了。
你可以自己将多种有色物质先混合成水溶液,再将一只粉笔插在里面,一段时间后,就能看到层析现象了。
凝胶过滤层析中线性和球状的区别
凝胶过滤层析中线性和球状的区别是不同的溶质因不同程度进入介质而在液相中停留的时间不同,凝胶的孔径和溶质分子不同。
在气相色谱法中,调整保留时间是指
保留时间就是样品在柱中停留的时间,也就是出峰的时间。同一样品保留时间相同,保留时间不同,样品肯定不同,保留时间相同,样品可能相同。
![层析柱保留时间怎么计算,层析的基本原理图4](/uploads/images/article/20230817/1692256101_64ddc765253a3.png)
气相色谱原理:
1、气相色谱分析主要是以气体作为其流动相,使用微量注射器将样品准确注入进样器。
2、被汽化后的待测样品被流动相也就是载气携带进入毛细管色谱柱或填充柱,由于待测样品中的不同组分在气相和固定相之间间的分配和吸附系数存在差异。
3、各不同组分通过载气的反复冲洗,在两相之间进行了多次分配,因而各组分以不同的时间和顺序从色谱柱中流出。
4、然后检测器对其进行测定与分析,根据各个组分出峰时间来进行定性分析,根据峰面积来进行定量分析。
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